D-荧光素钾盐溶液的稳定性
D-荧光素钾盐易溶于水和缓冲液,溶解度可高达25mg/mL。一般使用浓度为3-15mg/mL。
溶液的pH值、溶液中的氧气和保存时间对其保存过程中的稳定性非常重要。当溶液的pH<6.5(发生水解作用)或>7.5(发生消旋化作用,D型转化为L型)的情况下,D-荧光素钾盐相对不稳定。如果溶液中存在少量的氧气,将加速D-荧光素钾的降解速度。
D-荧光素配成溶液后,在*的保存条件(-80°C,*pH,无氧气)下,存在固定的降解速度:0.2%/天,因此配成溶液保存的D-荧光素应尽量在1年内使用完。
有水存在的情况下,主要发生消旋化作用,即D-荧光素转化成L-荧光素,有报道称L-荧光素对荧光素酶催化的酶促反应有抑制作用。
D-荧光素、D-荧光素钠和D-荧光素钾之间的区别
主要区别在于溶解和分散性能。D-荧光素钾盐在水和缓冲液中的溶解度高,且溶解速度较快,故在一般的生物学试验中常用D-荧光素钾盐。
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